Как долго и в каких условиях хранить изолят для последующего микробиологического исследования
Респираторный изолят перед последующим микробиологическим исследованием можно хранить 24 ч при температуре 4оС без утраты диагностической значимости. Вывод обосновывают Kneidinger N. и соавт. в результате исследования, охарактеризованного в Critical Care (1).
Авторы преследовали цель выявить оптимальные условия сохранения респираторного изолята для последующего микробиологического исследования. Для этого было выполнено проспективное обсервационное исследование в двух отделения интенсивной терапии и реанимации. Пациентам с предполагаемым диагнозом вентилятор-ассоциированной пневмонии выполняли бронхоальвеолярный лаваж через интубационную трубку с помощью фибробронхоскопа использованием традиционной методики. При этом вводили 100 мл стерильного изотонического солевого раствора порциями по 20 мл. Первые 20 мл удаляли для исключения бактериальной контаминации, тогда как остальные использовали для микробиологического анализа. Одну из порций в пределах 20 мин доставляли в микробиологическую лабораторию для немедленного исследования, другую хранили в течение 24 ч при температуре 4оС, еще одну – при -80оС с последующим микробиологическим изучением.
Проанализировано 259 изолятов. В 84 (32,4%) при микробиологическом исследовании, выполненном сразу после бронхоскопии, выявлено 115 микроорганизмов в количестве более общепринятого для бронхоальвеолярного лаважа диагностического порога (=> 104 КОЕ/мл). При изучении изолята, хранимого при температуре 4оС и -80оС, количество выделенных микроорганизмов в сопоставлении с анализом, выполненным сразу после лаважа, уменьшалось на 4 и 57 соответственно. Авторы приходят к заключению, что микробиологическое исследование изолята, получаемого бронхоальвеолярным лаважем, может быть выполнено через 24 ч при условии хранения при температуре 4оС без утраты диагностической значимости, тогда как хранение при -80оС нежелательно, в частности для выделения грамотрицательных микроорганизмов.
Значение представленной работы в том, что в соответствии с общепринятыми взглядами микробиологический анализ респираторного изолята необходимо выполнять сразу после его отбора. Во многих случаях это нереально в связи с отсутствием микробиолога. Выполненное исследование обосновывает диагностическую приемлемость анализа изолята, хранимого в течение 24 ч при температуре 4оС. Полученные данные совпадают с иными немногочисленными работами в этом направлении (2–5).
1. Kneidinger N., Warszawka J., Schenk P. et al. Storage of bronchoalveolar lavage fluid and accuracy of microbiological diagnostics in the ICU: a prospective observational study // Crit. Care. – 2013. – 17:R135.
2. Middleton R.M., 3rd, Huff W., Brickey D.A. et al. Comparison of quantitative cultures to semiquantitative loop cultures of bronchoscopic protected specimen brush samples // Chest. – 1996. – V. 109. – P. 1204–1209.
3. Gerorges H. , Santre C., Leroy O. et al. Reliability of quantitative cultures of protected specimen brush after freezing // Am. J. Respir. Crit. Care Med. – 1996. – V. 153 – P. 855–857.
4. de Lassence A., Joly-Guillou M.L., Martin-Lefevre L. et al. Accuracy of delayed cultures of plugged telescoping catheter samples for diagnosing bacterial pneumonia // Crit. Care Med. – 2011. – V. 29. – P. 1311–1317.
5. de Lassence A., Joly-Guillou M.L., Salah A. et al. Accuracy of delayed (24 hours) processing of bronchoalveolar lavage for diagnosing bacterial pneumonia // Crit. Care Med. – 2004. – V. 32. – P. 680–685.
Проф. Беляев А.В.
